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    您的位置:网站首页 > 技术文章 > 淋巴细胞分离液的基本理论

    点击次数:302 发布时间:2017-10-11

    淋巴细胞分离液的基本理论

      淋巴细胞分离液取新鲜抗凝血1ml,与生理盐水1:1混匀后,小心加于2ml细胞分离液之液面上;以400g(约1500转/分,半径15cm水平转子)离心20分钟,此时离心管中由上至下细胞分四层。*层:为血浆层。第二层:为环状乳白色淋巴细胞层。第三层:为透明分离液层。第四层:为红细胞层。收集第二层细胞放入含生理盐水4-5ml的试管中,充分混匀后,以400g(约1500转/分)离心20分钟。沉淀经2次洗涤后即得所需淋巴细胞。
     
      淋巴细胞分离液方法,取肝素抗凝血1ml加Hanks液1m1稀释后,沿管壁徐徐滴流叠加盛有2m1淋巴细胞分离液的试管内(注意勿与分离液混合,然后2000r/min水平离心20min,医学|教育|网搜集整理管内分为4层,自上而下依次为血浆,单个核细胞,颗粒白细胞、红细胞(图2-1)。用毛细管伸至单个核细胞层中(位于细胞分离液与血浆的界面上),沿管壁轻轻吸出全部细胞。然后用Hanks液洗两次,每次r/min离心10min,zui后用RPMIl640培养液将细胞配成2×106/m1的细胞悬液备用。
     
      淋巴细胞分离液主要组成成份是葡聚糖(右旋糖酐)与泛影酸葡甲胺。适用于从人抗凝血液中分离单个核细胞(主要为淋巴细胞),无菌条件下所分离的细胞可用于免疫学检测。

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